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一、制作標本的條件是什么?
1、載玻片
厚度應在0.8~1.2mm,光吸收多,不能使激發(fā)光在標本上聚集;載玻片必須光潔,厚度均勻,無明顯自發(fā)熒光。
2、蓋玻片
厚度在0.17mm左右,光潔。為了加強激發(fā)光,也可用干涉蓋玻片,可以使熒光順利通過,而反射激發(fā)光,這種反射的激發(fā)光女可激發(fā)標本。
3、標本
組織切片不能太厚,太厚的話激發(fā)光大部分消耗在標本下部,而物鏡直接觀察到的上部不充分激發(fā)。
4、封裱劑
常用甘油,無自發(fā)熒光,無色透明,熒光的亮度在pH8.5~9.5時較亮,不易很快褪去。常用甘油混合液作封裱劑。
5、鏡油
用油鏡觀察標本時,必須使用鏡油,建議有條件的話使用特制的無熒光鏡油,也可用上述甘油代替,液體石蠟也可用,只是折光率較低,對圖像質(zhì)量略有影響。
二、使用時需要注意哪些方面
1、按照出廠說明書要求進行操作,不要隨意改變。
2、在暗室中進行檢查。接上電源,點燃超高壓汞燈5到15分鐘,等光源發(fā)出強光穩(wěn)定后,眼睛適應暗室,再開始觀察標本。
3、防止紫外線對眼睛的損害,在調(diào)整光源時應戴上防護眼鏡。
4、檢查時間每次以1到2小時左右最佳,超過90分鐘的話,壓汞燈發(fā)光強度逐漸下降,熒光減弱;熒光也明顯減弱;最多不得超過3小時。
5、熒光顯微鏡光源壽命有限,標本應集中檢查,以節(jié)省時間,保護光源。天熱時,應加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再用時,須待燈泡充分冷卻后才能點燃。